(一)培养和生化反应 部分支原体厌氧,在5%~10%CO2,80%~90%湿度条件下,生长较好,支原体细胞的主要成分胆固醇和蛋白质均来自培养基,后者需含血清、蛋黄等。菌落似煎蛋,一般菌落大,100-300nm,生长需7-14d,另一种,菌落10-25nm,生长快,仅24-48h,称为T株,即解脲支原体。
(二)抗体和抗原检测 肺炎支原体感染2周后,约50%产生抗体,红细胞凝集试验阳性,效价1:32以上,恢复期效价4倍增长明显。40%~50%的病例链球菌MG凝集试验为阳性。可通过补体结合试验、间接血凝试验、酶联吸附试验等进行补充检测。此外,病变灌洗液可通过PCR检测。此外,肺炎支原体中的RNA可以通过应用同位素标记的DNA,使用快速基因探针检测系统来确定,与培养相比,符合率为89%。