抗体检测注意事项

　　问题为了保证试验的特异性和敏感性，无论是颗粒性抗原、组织提取物、多肽抗原、重组抗原都必须纯化，否则容易产生非特异性反应。在应用标记免疫分析中，可引起本底数值的增高，极大地影响试验的准确性。在检测自身抗体时，许多抗原是用组织提取物，更应注意抗原的纯化问题。由于不同组织、器官间可存在相同抗原成分，使得同一自身免疫病，可检出几种不同自身抗体，同一自身抗体又可出现在不同自身免疫病中，这就影响了检验的特异性。因此提示我们，关于这方面特异性抗原的提取、纯化和合成，还有许多工作要做，是一项任重道远的任务。还必须指出，无论检测哪一种抗体，所用抗原的片段或成分的不同，都可影响其特异性及敏感性。因此采用一种新抗原时，需要进行严格对照，方可确定其应用价值。必须明确，不同的检测方法，灵敏度、准确性、重复性并不完全相同，加上试剂盒质量不一，都影响到试验结果。在应用或建立一个方法时，检测系统中所有成分的浓度必须经过严格滴定，选择最恰当的浓度范围。例如酶联免疫吸附试验(ELISA)，抗原及酶结合物浓度低，最后吸光度值太小，易出现假阴性，如浓度太高，吸光度值偏大，甚至移到标准曲线的平台，即处于不敏感的范围便会明显影响结果的可靠性。抗体有保护性抗体，非保护性抗体之分，有些抗体的水平达到高峰后旋即下降乃至消失，有些抗体可长期存在直至终身。如乙肝核心抗体(抗-HBc)，阳性率可高达70%左右，临床医生常因此产生困惑。其实这是抗-HBc的总抗体，可能长期存在。如其滴度低，即为既往感染过乙肝，有流行病学意义，高滴度才有临床诊断意义。再如自身抗体测定中，少数正常人也存在有少量自身抗体，它不仅对机体无害，而且能帮助机体清除衰老及变质的细胞对机体有利。另外，在临床诊断中，须针对不同发病机理检测相应抗体，如I型超敏反应应检测IgE，而在Ⅱ型超敏反应主要测IgG、IgM型抗体，又如鼻咽癌患者查的是EB病毒壳膜抗原-IgA(IgA/VCA抗体)。另外抗体测定和其他检验一样，存在着假阳性、假阴性的问题，可能由于方法学的不完善引起，或者由于机体反应性的不同所致，在解释结果时务必注意。