1期梅毒的確診需要結合病史、臨床表現和實驗室檢查進行綜合診斷，慎重做出診斷。
1、有感染史，潛伏期一般為2～3周。
2.臨床表現：
（1）硬下疳直徑1～2cm，圓形或橢圓形，略高於皮膚表面，表面輕度糜爛或淺潰瘍，分泌物少，肉紅色或暗紅色，不痛不癢，診斷時有軟骨樣硬度。通常為單發或多發。多見於外生殖器，也可見於肛門、宮頸、嘴唇、乳房、手指等。
（2）腹股溝淋巴結或患處附近的淋巴結可腫大，常為數個，大小不一，質硬，無粘連，無破裂，無疼痛。
（3）可自行消退。
3.實驗室檢查：
(1)暗示場鏡檢查：在皮損組織液或淋巴結穿刺液中可發現梅毒螺旋體；
(2)梅毒血清學試驗陽性。
其中，特異性梅毒螺旋體抗原血清學試驗（FTA-ABS和TPHA）在肉芽腫發生後1～2周開始出現陽性，非螺旋體抗原試驗（RPR）在肉芽腫發生後3～4周開始出現陽性。因此，如果臨床上懷疑是梅毒，且血清學反應呈陽性，應在1～2周後重新檢測。如果皮疹已經出現了1到2個月，但血清學反應仍為陰性，則可以排除硬化性軟疣。
