體液免疫主要是由B細胞承擔,反映體液免疫的項目有B細胞及其亞群計數、B細胞分泌的免疫球蛋白或自身抗體水平、補體及循環免疫複合物水平測定等。
(一)B 細胞及其亞群計數
由於淋巴細胞表面有一種抗原稱為CD抗原或CD分子(已發現130餘種),不同的淋巴細胞類型有不同的CD抗原。通過採用單克隆抗體以免疫熒光技術檢測各群淋巴細胞的CD 抗原來計數淋巴細胞的數量。B細胞表面抗原為CD19 或 CD20。根據B細胞產生抗體時是否需要T細胞輔助分為B1(標記為CD5+CD19+ )和B2(標記為CD5-CD19+)細胞。前者為T細胞非依賴性細胞,產生低親和力的IgM、IgA和IgG3抗體,參與抗細菌感染的黏膜免疫應答,還能產生多種針對自身抗原的抗體,與自身免疫病相關;後者為T細胞依賴性細胞,可產生高親和力抗體,是參與體液免疫應答的主要B細胞,還有抗原提呈和免疫調節功能。外周血中B1細胞和B2細胞的百分比正常值分別為(0-0.964%)和(1.45%-9.49%)。研究顯示,系統性紅斑狼瘡患者的外周血B1淋巴細胞亞群的百分比、B1/B2淋巴細胞亞群比值顯著高於正常對照,B1淋巴細胞亞群與狼瘡活動性顯著相關。
(二)B 細胞功能檢測
1.免疫球蛋白 (Ig) 測定:(1)IgG、IgA、IgM 定量檢測:用散射比濁計進行測定的血清免疫球蛋白正常值為:IgG 6.94-16.18g/L,IgA0.7-3.8g/L,IgM 0.6-2.62g/L。高於正常值為B細胞功能亢進,低於以下值為B細胞功能缺陷:IgG<2.5g/L,IgA<(0.05-0.1)g/L,IgM<(0.05-0.1) g/L。表1列舉不同疾病的血清 IgG、IgA和IgM水平變化。(2)IgE的檢測:包括IgE 總量測定和過敏原特異性 IgE檢測,前者正常值為0-100IU/ml,數值與年齡相關,因過敏與非過敏者的總 IgE 水平有較大交叉,因此總 IgE 測定對於篩查過敏性疾病的意義不大。但也有資料顯示嬰幼兒總 IgE 增高患過敏性疾病的可能性增大,成人總 IgE 水平低(< 50 mg/L)患過敏性疾病的可能性小。過敏原特異性 IgE檢測為檢測針對某種過敏原的特異性 IgE 類抗體含量。經典測定法為放射性過敏原吸附試驗(為體外檢測血清過敏原特異性 IgE),也可用皮膚試驗或點刺法。放射性過敏原吸附試驗適於:①嚴重的皮炎及皮膚劃痕症陽性患者;②皮膚試驗可能激發過敏性休克者;③有毒、非水溶性或高度致敏作用的抗原;④食品過敏原等。皮膚試驗和接觸性過敏的誘發是檢測遲髮型過敏反應的兩種常用方法。
2.特異性抗體應答反應 主要是檢測機體接觸各種病原抗原後產生抗體的能力。免疫缺陷的患者抗體產生能力低下或缺如。
(三)自身抗體檢查
自身抗體是B細胞針對自身抗原成分所產生的對自身組織或器官起反應的抗體,自身抗體可以針對細胞內成分也可以針對細胞外成分。根據影響的範圍,自身抗體可以分為器官特異性和器官非特異性自身抗體。
1.器官非特異性自身抗體
(1)類風溼因子(RF):是抗人類多克隆 IgG Fc 段的自身抗體。一般實驗室檢測的類風溼因子是 IgM 抗體 。因為類風溼因子最先在類風溼性關節炎病人血清中檢測到,故得此名稱。一般正常人類風溼因子滴度為 1:80 。需要強調的是即便存在類風溼因子,甚至是高滴度的,也不能做為診斷類風溼關節炎的特異性依據。約 1%-5% 健康人群體內存在類風溼因子。
(2)抗核抗體(ANA):抗核抗體是以細胞的核抗原為靶抗原的自身抗體的總稱。使用不同的血清稀釋度(滴度)可以對血清中抗核抗體行半定量。結果以陽性(滴度)、陰性表示。還可描述熒光圖譜,如均質型、周邊型、斑點型、核仁型等,各型提示存在不同種類抗體。抗核抗體通常作為各種針對核抗原的不同抗體的篩查實驗。抗核抗體檢測是診斷系統性紅斑狼瘡等結締組織病的重要實驗室依據。
(3)抗雙鏈DNA抗體(ds-DNA 抗體):是診斷系統性紅斑狼瘡的特異性抗體,抗體滴度還與疾病的嚴重程度相關,有助於臨床診斷、判斷預後以及瞭解系統性紅斑狼瘡的活動程度。
(4)抗可提取核抗原(extractable nuclear antigen,ENA )抗體:血清中針對一組水溶性、可使用鹽水提取的核抗原成分的抗體。抗ENA 抗體是診斷自身免疫病有效的實驗室檢測(表 3 ),包括對系統性紅斑狼瘡、系統性硬化症、多發性肌炎、皮肌炎、混合性結締組織病、乾燥綜合徵和重疊綜合徵等的診斷。
( 5)抗 Sm 抗體:對診斷系統性紅斑狼瘡具有高度特異性,但診斷時系統性紅斑狼瘡病人只有15%-30%呈陽性,與病情活動無關。亞裔和非洲裔陽性率比白種人高。
(6)抗核糖核蛋白(U1RNP)抗體:是混合性結締組織病的特徵性抗體。系統性紅斑狼瘡 和系統硬化症患者血清中也可陽性。
(7)抗SSA和抗SSB抗體:兩者常同時存在,是乾燥綜合徵的特徵性抗體。 系統性紅斑狼瘡病人也可存在上述兩種抗體,尤其是明顯對光敏感而無腎損害的病人。此外,新生兒狼瘡綜合徵也可出現抗 SSA 和 / 或 SSB 抗體。
(8)抗 Jo-1 抗體:是針對組氨酰-tRNA 合成酶的抗體。與皮肌炎關係較密切。雖然僅 25%-30%的皮肌炎病人抗 Jo-1 抗體陽性,但具有較高特異性。在合併有間質性肺部疾病的皮肌炎患者抗Jo-1 抗體陽性率較高。
(9)抗 Scl-70 抗體:是針對DNA 拓撲異構酶 I的抗體,與瀰漫性系統性硬化症關係最大,陽性率約 30%。
(10)抗組蛋白抗體:與藥物性狼瘡相關。
(11)抗中性粒細胞抗體( ANCA):主要有2種免疫熒光類型,即分佈於細胞漿 (cANCA) 和分佈於細胞核周圍 (pANCA)。cANCA 與 Wegener's肉芽腫有關,滴度與臨床表現嚴重性相關。
(12)抗心磷脂抗體:約40%的系統性紅斑狼瘡患者抗心磷脂抗體陽性。
2.器官特異性自身抗體
此類抗體較多,而且不斷有新的抗體被發現和應用於臨床。由於僅僅是針對特定組織或器官抗原產生的抗體,所以這類抗體主要與相對應的組織器官起反應,引起這些組織器官的損害。一般這類抗體在診斷相應的疾病中具有重要的價值,尤其是存在高滴度抗體時。