测定原理
ELISA法:用灭活风疹病毒抗原包被的载体可与被检样品中的特异性抗体结合,用酶标记的抗人免疫球蛋白与底物检测相应抗体。
试剂
除灭活风疹病毒抗原包被的微孔板,阴、阳性参考血清外,其余同一般ELISA。
操作方法
(1)样品采集,作过筛试验仅需采集单份血样,但若需判断病毒感染者的免疫状态,需对可疑风疹患者在出现斑疹后3天内以及随后的14~21天分别取样同时检测。
(2)同一般ELISA,在对照和样品各孔中加PBS 50μl,继加样品10μl,25℃保温45min,洗涤、吸干。
(3)各孔加酶标记物250μl,同法保温和洗涤。
(4)再加pNPP底物溶液250μl,同法保温和洗涤后,加1mol/L氢氧化钠50μl中止反应,测定各孔吸光度值405nm,判断被测样品结果。
(5)若为阳性结果,可将样品作进一步稀释后作抗体滴度测定,比较先后两份样品结果,并进行判断: