1、补体结合试验是本病重要的血清学诊断方法，能检测两种抗体：砂眼衣原体抗体和鹦鹉热衣原体抗体。因为人群中常见有衣原体感染，所以本试验阳性有助于诊断，但不能靠其结果决定诊断。患者血清滴度高，多为1:64或以上，而结膜炎砂眼衣原体感染时血清滴度低(1:16—1:32)。一般而言，本试验血清滴度1:8或1:6对本病诊断有提示意义，而1:64或以上则有诊断意义。恢复期患者血清滴度降低。此外，血清试验的结果不完全与抗生素治疗反应相平行。
2、微量免疫荧光试验能检测不同血清型衣原体特异性抗体，比补体结合试验更为敏感和特异，但因试验条件的限制，目前尚难以广泛应用。
3、病原体培养宜取肿大的淋巴结穿刺物接种在鸡胚卵黄囊，或做组织(细胞)培养或小白鼠颅内接种。阳性者有诊断价值。另需做细菌培养和涂片革兰氏染色，以除外葡萄球菌或其他细菌所致的淋巴结炎症。
4、活体组织检查取皮肤、黏膜损害或淋巴结制成切片，观察其病理变化，对诊断有提示意义。
5、其他可有高r球蛋白血症，白蛋白/球蛋白比例倒置，lgA、lgG增高，轻度贫血，白细胞增多，血沉加快，梅毒血清试验假阳性，冷沉球蛋白和类风湿因子阳性等。本病发展到不同时期，应与不同的疾病相鉴别。早期应与下列疾病相鉴别：初期梅毒、生殖器疱疹、软下疳、腹股沟肉芽肿以及其他原发性或继发性感染等。出现淋巴结病时除了应与上述疾病鉴别外，尚应考虑到恶性肿瘤(淋巴瘤、转移癌)和其他感染性疾病如猫抓病、结核病、单核细胞增多症、土拉菌病等。晚期肛门直肠病变应与腹股沟肉芽肿、痔、尖锐湿疣、化脓性汗腺炎、溃疡性和炎症性结肠疾病、丝虫病以及肛门和直肠癌等鉴别。
