艾滋病耐药性测试的方法和应用

I.耐药性检测方法的类型
HIV耐药性检测可以采用基因型和表型两种方法。我们常用的基因型方法实际上是检测导致表型耐药性或影响病毒学反应的基因突变，即使用PCR方法对药物作用的靶基因（如逆转录酶或蛋白酶）进行序列扩增和测序。基因型耐药性检测首先要获得病毒的特定基因片段，确定基因序列，将序列提交给选定的数据库，并对数据库进行比较，得出耐药性突变和耐药性的判断，通常在1-2周内得出结果。表型耐药性测试很复杂，需要首先获得病毒的特定基因片段，根据病人的基因突变构建假病毒，测试构建的假病毒在药物存在下的复制和生长能力，并通过与野生毒株的比较确定病人体内病毒对药物的敏感或耐受程度。表型耐药性检测要求较高，一般机构无法完成，普及起来也比较困难。
II.何时应进行耐药性检测
1.新诊断的患者：无论患者是否即将接受抗病毒治疗，都提倡在诊断后进行高级耐药性检测。已有研究表明，耐药的HIV毒株可以传播给从未接受过治疗的患者，使这些患者从一开始就获得初级耐药性，即所谓的传播性耐药。传播性耐药性与患者的治疗失败有关，对这类患者进行耐药性检测，有助于选择能达到最大病毒抑制效果的治疗方案。
2.接受抗病毒治疗的患者。对于接受抗病毒治疗的患者，如果在病毒学上没有反应（HIV RNA>1000拷贝/毫升）或在改变抗病毒治疗方案时病毒抑制效果不理想，应进行耐药性检测，以确定是否发生耐药性以及对哪种药物发生耐药性，从而指导选择有效的抗HIV药物进行后续治疗。对于HIV RNA为500-1000copies/ml的患者，耐药性检测较为困难，但仍应尽可能进行；对于<500copies/ml的患者，不建议进行耐药性检测。 < span="">
3、孕妇。所有孕妇在开始抗逆转录病毒治疗前应进行基因型耐药性检测。抗逆转录病毒疗法的目的是最大限度地减少血浆病毒载量和防止艾滋病毒的母婴传播，其主要目标是实现最大限度的病毒抑制。这就是为什么在开始对孕妇进行抗逆转录病毒治疗之前，以及对已经接受治疗但仍有可检测到的HIV RNA的孕妇应进行基因型耐药性检测。
III.意义
耐药性只是治疗失败的可能原因之一，它与导致治疗失败的其他因素密切相关，包括药物的抗病毒活性不足、用药依从性差以及药代动力学的个体差异。因此，不应孤立地看待耐药性检测结果，而应结合病毒载量和CD4+T淋巴细胞计数的变化、临床表现以及其他检测的变化进行分析。耐药性检测结果必须结合以前的治疗史、血浆病毒载量的长期变化以及依从性程度来解释。