鹽水介質法 ⑴試管法①取小試管3支，1支註明抗D，另1支註明陽性對照，最後1支註明陰性對照;②將室溫鹽水反應活性的抗D血清各1滴加入上述試管內;③抗D試管中加入1滴5%待檢者紅細胞(鹽水、血清)
血型匹配 懸液，陽性對照及陰性對照試管中分別加入相應的陽性紅細胞及陰性紅細胞懸液1滴;④輕輕混勻，於3000r/min離心15s;⑤取出輕輕擺動觀察有無凝集。
結果判讀：抗D試管中出現凝集，而陰性對照試管不凝集，陽性對照試管凝集，待檢者為陽性;抗D管和陰性對照管均不凝集，陽性對照試管凝集，待檢者為陰性。
⑵平板法①取潔淨平板1塊，用記號筆劃出反應小格，在左側註明抗D，中間段註明陰性對照，右側註明陽性對照;②將室溫鹽水反應的抗D血清各1滴加入上述小格內;③抗D小格內加入待檢者5%紅細胞懸液1滴，陽性對照小格內加入陽性對照紅細胞懸液1滴，陰性對照小格加入陰性對照紅細胞懸液1滴;④用乾淨玻棒攪拌紅細胞懸液和試劑血清充分混合;⑤連續輕輕傾斜轉動平板，一般在2min內觀察結果，或按試劑說明書規定的時間觀察結果。
