操作方法:
取試管6支,其中3支各精密加入對照品溶液1ml,另3支各精密加入供試品溶液1ml,置37℃±0.5℃水浴中,保溫5 分鐘,精密加入預熱至37℃±0.5℃的血紅蛋白試液5ml,搖勻,並準確計時,在37℃±0.5℃水浴中反應10分鐘。立即精密加入5%三氯醋酸溶液 5ml,搖勻,濾過,取續濾液備用。另取試管2支,各精密加入血紅蛋白試液5ml,置37℃±0.5℃水浴中保溼10分鐘,再精密加入5%三氯醋酸溶液 5ml,其中1支加供試品溶液1ml,另1支加上述鹽酸溶液1ml,搖勻,濾過,取續濾液,分別作為供試品和對照品的空白對照,照分光光度法(附錄ⅣA) 在275nm的波長處測定吸收度,算出平均值AS和A,按下式計算:A×Ws×n。
每1g含蛋白酶活力(單位)=As×W×10×181.19式中,AS為對照品的平均吸收度;A為供試品的平均吸收度;Ws為對照品溶液每1ml中含酪氨酸的量,μg;W為供試品取樣量,g;n為供試品稀釋倍數。
在上述條件下,每分鐘能催化水解血紅蛋白生成1μmol酪氨酸的酶量,為一個蛋白酶活力單位。