临床和实验室发现急性肝炎的患者，结合HBsAg阳性，可以确诊。然而，在一些急性乙型肝炎患者中，他们的血液中可能检测不到HBsAg（HBsAg一直是阴性或检测不敏感），对于这样的患者，我们必须依靠HBsAg以外的其他指标。第二，无症状的乙肝表面抗原携带者在中国相当普遍。这些患者如果合并其他类型的急性肝炎（如甲肝、丙肝、EB病毒或CMV病毒性肝炎、中毒性肝炎等），由于其血液中HBsAg阳性，很容易被误诊为急性乙肝，有时很难将这类患者与真正的急性乙肝相区别。
诊断急性肝炎患者一般没有什么困难，尤其是急性黄疸型：急性发病；突然出现明显的疲劳和虚弱，没有其他解释，并有明显的胃肠道症状；大约一周后出现黄疸；肝脏轻度至中度肿大，有触痛；血清ALT值非常高。没有黄疸的人有时没有明显的体征或症状，但如果发病确实很急，有胃肠道症状和肝脏肿大，ALT非常高，通常不是很困难。
一般认为，可以根据以下情况确认患者存在乙肝病毒：
①HBsAg阳性。(2）抗HBcIgM抗体阳性，特别是效价很高时，往往代表患者体内存在乙肝病毒。3）DNA多态性酶活性明显升高或e抗原阳性。血液中出现丹毒颗粒或肝脏活检组织中出现HBsAg或HBcAg也表明体内存在病毒。
确定病人的急性肝炎确实是由乙肝病毒引起的，而不是由乙肝病毒携带者的其他原因引起的急性肝炎。患者的乙肝表面抗体（抗-HBs）在急性期和恢复期由阴性转为阳性或滴度增加4倍或更多。(2）急性期和恢复期的双份血清，乙肝核心抗体（抗-HBc）增加4倍或以上。
