小儿MP肺炎的诊断，依据的是患儿的病史、临床表现和辅助检查，临床医生需综合分析这些临床资料，有时还需结合MP的流行病学情况，才能做出正确、全面的诊断。
诊断要点为：①持续剧烈咳嗽，X线所见远较体征为显著。如在年长儿中同时发生数例，可疑为流行病例，可早期确诊。②白细胞数大多正常或稍增高，血沉多增快，Coombs试验阳性。③青、链霉素及磺胺药无效。④血清冷凝集素(属IgM型)大多滴度上升至1∶32或更高，阳性率50%～75%，病情愈重阳性率愈高。冷凝集素大多于起病后第1周末开始出现，至第3～4周达高峰，以后降低，2～4月时消失。此为非特异性反应，也可见于肝病、溶血性贫血、传染性单核细胞增多症等，但其滴度一般不超过1∶32。而腺病毒所致年长儿肺炎，冷凝集素多为阴性。⑤血清特异性抗体测定有诊断价值，临床常采用者有补体结合试验，间接血凝试验，间接免疫荧光法及酶联免疫吸附试验等;此外也可用酶联免疫吸附试验检测抗原。近年有用MP膜蛋白制成的单克隆抗体检测标本中抗原的报道。应用DNA探针及PCR检测MP-DNA，诊断有快速、特异性高等优点。⑥用病人痰液或咽拭子洗液培养MP需时太久，常要2～3周，因此对临床帮助不大。
目前，许多用于检测诊断MP的实验方法和试剂还处在实验研究阶段，其临床应用的准确度和敏感度及可信度都有待临床评价;已通过卫生部认定可临床普及应用的试剂仍很少。
