龜也是一種兩性的動物，對此，對龜的雌雄可從體形，成熟度等方法進行鑑別。通常來說，體型小的幼年龜(個體重250克以下)因性未成熟，性別難以鑑定。同年齡的龜，雌性個體體形總是大於雄性個體。常見的巴西龜雄龜個體重達300克，雌龜個體重500克左右性成熟。其他龜類因品種不同而標準也不同。總體來說對於常見的龜，無論水龜還是陸龜，從體形上通常可以通過以下性別特徵來鑑定其性別：
雌性龜：背甲較短且寬，腹甲平坦中央無凹陷，尾細且短，尾基部細，洩殖孔距腹甲後緣較近，腹甲的2塊肛盾形成的缺刻較淺，缺刻角度較大。
雄性龜：背甲較長且窄，腹甲中央略微向內陷，尾粗且長，尾基部粗，洩殖孔距腹甲後緣較遠，腹甲的2塊肛盾形成的缺刻較深，缺刻角度較小。
對於大多數種類的同年的成年龜，雄龜體形較薄而小;雌龜體形圓厚且大。
此外對於成熟個體還可以通過下面的方法進行鑑別：
將龜的腹甲朝上，左手的大拇指、食指二中指分別將龜的前肢、頭壓迫縮入殼內，右手將龜的尾擺直，若龜的洩殖腔孔內有黑色的陰莖伸出，則為雄性;若龜的洩殖腔孔排出泡泡或稀粘液，則為雌性。
此外，還有辦法可以比較方便的辨別性別的。
1、排洩孔位置及形狀可分辨出雌雄：公龜的位置接近尾端，孔形長形。母龜的位置接近腹甲，孔形圓形。
2、尾部的粗細大小，公龜尾較粗大,母龜較細短。
3、腹甲是否凹陷，公龜有明顯的凹陷,母龜平坦。
