測定原理
ELISA法:用滅活風疹病毒抗原包被的載體可與被檢樣品中的特異性抗體結合,用酶標記的抗人免疫球蛋白與底物檢測相應抗體。
試劑
除滅活風疹病毒抗原包被的微孔板,陰、陽性參考血清外,其餘同一般ELISA。
操作方法
(1)樣品採集,作過篩試驗僅需採集單份血樣,但若需判斷病毒感染者的免疫狀態,需對可疑風疹患者在出現斑疹後3天內以及隨後的14~21天分別取樣同時檢測。
(2)同一般ELISA,在對照和樣品各孔中加PBS 50μl,繼加樣品10μl,25℃保溫45min,洗滌、吸乾。
(3)各孔加酶標記物250μl,同法保溫和洗滌。
(4)再加pNPP底物溶液250μl,同法保溫和洗滌後,加1mol/L氫氧化鈉50μl中止反應,測定各孔吸光度值405nm,判斷被測樣品結果。
(5)若為陽性結果,可將樣品作進一步稀釋後作抗體滴度測定,比較先後兩份樣品結果,並進行判斷: