確定上皮幹細胞在鼓膜上的分佈，鼓膜穿孔後幹細胞的變化，鼓膜上皮不同部位的體外培養生長特點，建立鼓膜幹細胞體外培養和增殖的方法。
4只幼年SD大鼠和4只成年SD大鼠作正常鼓膜觀察，28只成年大鼠作鼓膜緊張部中央2mm穿孔。於穿孔後不同時間取鼓膜冰凍切片，進行β1整合素和角蛋白19免疫組化檢測。30個成年SD大鼠鼓膜，用絲裂黴素C損傷粘膜面，分成鼓環上皮和緊張部中央上皮兩部分，比較鼓環和緊張部兩處細胞的細胞倍增時間。以1小時為標準，把鼓環細胞按貼壁時間分類。
角蛋白19 和β1整合素陽性細胞在緊張部分佈於鼓環和錘骨柄區域，在鬆弛部散在分佈，在緊張部中央無陽性細胞。幼年鼠和成年鼠無差別。緊張部急性穿孔後鼓環和錘骨柄陽性細胞數量增加，穿孔邊緣無陽性染色。體外培養鼓環上皮細胞倍增時間明顯短於緊張部中央上皮。1小時內貼壁的細胞，生長活躍，產生較大的集落，富含上皮幹細胞。
上皮幹細胞在鼓膜緊張部分佈於鼓環和錘骨柄區域，在緊張部的中央沒有幹細胞。在適當的培養液中，幹細胞增殖良好，並可以通過貼壁時間進行初步的純化。
