蟲類活血藥雙龍丸對兔實驗性動脈粥樣硬化的抑制作用

　　雙龍丸由經典名方止痙散化裁而來，由地龍，全蠍，蜈蚣等組成，具有平肝潛陽，搜風剔絡，活血定痛的功效，初步研究證實具有調節PGI2/TXA2平衡的作用，臨床用雙龍丸治療的冠心病患者，其心肌缺血總負荷、ET和AngII降低，而漿NO水平升高，證明雙龍丸抗AS形成和抗心肌缺血作用與內皮保護作用有關[]。本研究旨在通過建立兔動脈粥樣硬化模型，用光鏡和電鏡從細胞、亞細胞水平探討雙龍丸對平滑肌細胞增生、遷移的作用，為其進一步臨床應用提供理論基礎。
　　1、材料和方法
　　1.1 實驗藥品及儀器
　　膽固醇：Sigma（美國）上海分裝；豬油：購於市場。開搏通：中美合資上海施貴寶公司生產，批號：0108031，12.5mg/粒。雙龍丸：購自上海曙光醫院藥劑科，每粒0.5g；病理切片機（LEICA RM 2165，德國產）；攤片烤片機（CS-IV型，孝感市電子儀器廠生產）；光學顯微鏡照相系統（OLYMPNS，BX60，日本產）；H-600-4型透射電子顯微鏡（日本日立公司製造）；電鏡攝象系統（PANASONIC； 型號MV-CP410，日本產）。
　　1.2 動物模型
　　選取體重2.0-2.5kg的雄性新西蘭大白兔（New Zealand Rabbits）（由上海曙光醫院實驗動物中心提供），隨機分為4組，每組6只，單組分籠飼養。I組：空白對照組，飼餵正常顆粒飼料，自由飲水12周。II組：實驗對照組，於造模當日清晨一次性注射小牛血清白蛋白1g，然後每天飼餵含1g膽固醇和3％豬油的飼料12周，飲水不限。III組：開搏通對照組，於造模當日清晨一次性注射白蛋白1g，然後每天飼餵含1g膽固醇和3％豬油的飼料，同時每隻給予開搏通（captopril）10mg/kg/d，灌胃12周，飲水不限。IV組：雙龍丸組：於造模當日清晨一次性注射白蛋白1g，然後每天飼餵含1g膽固醇和3％豬油的飼料，同時每隻給予雙龍丸（2.52g/kg/d，10倍成人劑量），灌胃12周，飲水不限。
　　1.3 觀察項目
　　1.3.1 光鏡檢查
　　實驗末處死，將遊離的主動脈段沿長軸剪開，肉眼觀察動脈內壁是否光滑，有無AS斑塊，取主動脈弓處1cm動脈段用10％福爾馬林緩衝液固定、HE染色、石蠟包埋做光鏡檢查。
　　1.3.2 電鏡檢查
　　氣栓處死後，迅速取出主動脈主幹，立即投入2.5％戊二醛中4℃預固定2h，用1％的鋨酸固定2h，置70％酒精中冰箱過夜，用環氧樹脂618包埋製備超薄切片。電鏡觀察。
　　1.4 統計學處理
　　SPSS10.0統計軟件，採用獨立T檢驗，以均數±標準差表示。