1、補體結合試驗是本病重要的血清學診斷方法，能檢測兩種抗體：砂眼衣原體抗體和鸚鵡熱衣原體抗體。因為人群中常見有衣原體感染，所以本試驗陽性有助於診斷，但不能靠其結果決定診斷。患者血清滴度高，多為1:64或以上，而結膜炎砂眼衣原體感染時血清滴度低(1:16—1:32)。一般而言，本試驗血清滴度1:8或1:6對本病診斷有提示意義，而1:64或以上則有診斷意義。恢復期患者血清滴度降低。此外，血清試驗的結果不完全與抗生素治療反應相平行。
2、微量免疫熒光試驗能檢測不同血清型衣原體特異性抗體，比補體結合試驗更為敏感和特異，但因試驗條件的限制，目前尚難以廣泛應用。
3、病原體培養宜取腫大的淋巴結穿刺物接種在雞胚卵黃囊，或做組織(細胞)培養或小白鼠顱內接種。陽性者有診斷價值。另需做細菌培養和塗片革蘭氏染色，以除外葡萄球菌或其他細菌所致的淋巴結炎症。
4、活體組織檢查取皮膚、黏膜損害或淋巴結制成切片，觀察其病理變化，對診斷有提示意義。
5、其他可有高r球蛋白血癥，白蛋白/球蛋白比例倒置，lgA、lgG增高，輕度貧血，白細胞增多，血沉加快，梅毒血清試驗假陽性，冷沉球蛋白和類風溼因子陽性等。本病發展到不同時期，應與不同的疾病相鑑別。早期應與下列疾病相鑑別：初期梅毒、生殖器皰疹、軟下疳、腹股溝肉芽腫以及其他原發性或繼發性感染等。出現淋巴結病時除了應與上述疾病鑑別外，尚應考慮到惡性腫瘤(淋巴瘤、轉移癌)和其他感染性疾病如貓抓病、結核病、單核細胞增多症、土拉菌病等。晚期肛門直腸病變應與腹股溝肉芽腫、痔、尖銳溼疣、化膿性汗腺炎、潰瘍性和炎症性結腸疾病、絲蟲病以及肛門和直腸癌等鑑別。
