荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)是在20世纪80年代末在放射性原位杂交技术的基础上发展起来的一种非放射性分子细胞遗传技术,以荧光标记取代同位素标记而形成的一种新的原位杂交方法,探针首先与某种介导分子(reporter molecule)结合,杂交后再通过免疫细胞化学过程连接上荧光染料.FISH的基本原理是将DNA(或RNA)探针用特殊的核苷酸分子标记,然后将探针直接杂交到染色体或DNA纤维切片上,再用与荧光素分子偶联的单克隆抗体与探针分子特异性结合来检测DNA序列在染色体或DNA纤维切片上的定性、定位、相对定量分析.FISH具有安全、快速、灵敏度高、探针能长期保存、能同时显示多种颜色等优点,不但能显示中期分裂相,还能显示于间期核.同时在荧光原位杂交基础上又发展了多彩色荧光原位杂交技术和染色质纤维荧光原位杂交技术.
什么是荧光原位杂交
发布于 2023-11-13 14:54
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原位杂交的探针按标记分子类型分为放射性标记和非放射性标记。用同位素标记的放射性探针优势在于对制备样品的要求不高,可以通过延长曝光时间加强信号强度,故较灵敏。缺点是探针不稳定、自显影时间长、放射线的散射使得空间分辨率不高、及同位素操作较繁琐等。采用荧光标记系统则可克服这些不足,这就是FISH技术。FISH技术作为非放射性检测体系,有以下特点。
优点:1、荧光试剂和探针经济、安全;2、探针稳定,一次
发布于 2023-11-13 15:07
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仪器设备
1、医用微波炉;
2、水浴锅;
3、荧光显微镜;
4、数字显微照相机。
FISH试剂
(1)1×PBS:由10×PBS溶液稀释而成,储存于4℃;
(2)20×SSC(pH7.0);
(3)2×SSC,由20×SSC溶液稀释而成;
(4)25mg/ml蛋白酶K消化液。
(5)变性液(70%甲酰胺+2×SSC,pH7.0):4ml20×SSC;8ml蒸馏水;28ml甲酰胺。每次新鲜配制。
发布于 2023-11-13 15:14
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荧光原位杂交(FluorescenceinsituhybridizationFISH)是一门新兴的分子细胞遗传学技术,是20世纪80年代末期在原有的放射性原位杂交技术的基础上发展起来的一种非放射性原位杂交技术。目前这项技术已经广泛应用于动植物基因组结构研究、染色体精细结构变异分析、病毒感染分析、人类产前诊断、肿瘤遗传学和基因组进化研究待许多领域。FISH的基本原理是用已知的标记单链核酸为探针,按
发布于 2023-11-13 15:20
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概述
原位鳞状细胞癌是一种发生在皮肤,黏膜的表皮内的鳞状细胞癌,在医院的时候碰到过几个,那么我们该怎么办呢,现在我把有些经验和大家分享一下,希望能对大家有所帮助。
步骤/方法:
1、
首先应该尽量不要暴晒,少用含有砷剂的化妆品,这些化工厂也最好少去,平时饮食清淡,油腻辛辣食物少吃。保持良好的心态
2、
如果皮肤损伤比较小的话,可以用激光治疗,也可以用电灼和冷冻,这些疗效都差不多的。
3、
发布于 2024-07-16 16:27
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