发布于 2023-11-13 15:07

  原位杂交的探针按标记分子类型分为放射性标记和非放射性标记。用同位素标记的放射性探针优势在于对制备样品的要求不高,可以通过延长曝光时间加强信号强度,故较灵敏。缺点是探针不稳定、自显影时间长、放射线的散射使得空间分辨率不高、及同位素操作较繁琐等。采用荧光标记系统则可克服这些不足,这就是 FISH技术。FISH技术作为非放射性检测体系,有以下特点。

  优点:1、荧光试剂和探针经济、安全;2、探针稳定,一次标记后可在两年内使用;3、实验周期短、能迅速得到结果、特异性好、定位准确;4、FISH可定位长度在1kb的DNA序列,其灵敏度与放射性探针相当;5、多色FISH 通过在同一个核中显示不同的颜色可同时检测多种序列;6、既可以在玻片上显示中期染色体数量或结构的变化,也可以在悬液中显示间期染色体DNA的结构。

  缺点:不能达到100%杂交,特别是在应用较短的cDNA探针时效率明显下降。

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荧光原位杂交(fluorescenceinsituhybridization,FISH)是在20世纪80年代末在放射性原位杂交技术的基础上发展起来的一种非放射性分子细胞遗传技术,以荧光标记取代同位素标记而形成的一种新的原位杂交方法,探针首先与某种介导分子(reportermolecule)结合,杂交后再通过免疫细胞化学过程连接上荧光染料.FISH的基本原理是将DNA(或RNA)探针用特殊的核苷酸
发布于 2023-11-13 14:54
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荧光原位杂交(FluorescenceinsituhybridizationFISH)是一门新兴的分子细胞遗传学技术,是20世纪80年代末期在原有的放射性原位杂交技术的基础上发展起来的一种非放射性原位杂交技术。目前这项技术已经广泛应用于动植物基因组结构研究、染色体精细结构变异分析、病毒感染分析、人类产前诊断、肿瘤遗传学和基因组进化研究待许多领域。FISH的基本原理是用已知的标记单链核酸为探针,按
发布于 2023-11-13 15:20
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仪器设备 1、医用微波炉; 2、水浴锅; 3、荧光显微镜; 4、数字显微照相机。 FISH试剂 (1)1×PBS:由10×PBS溶液稀释而成,储存于4℃; (2)20×SSC(pH7.0); (3)2×SSC,由20×SSC溶液稀释而成; (4)25mg/ml蛋白酶K消化液。 (5)变性液(70%甲酰胺+2×SSC,pH7.0):4ml20×SSC;8ml蒸馏水;28ml甲酰胺。每次新鲜配制。
发布于 2023-11-13 15:14
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发布于 2023-11-13 15:00
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发布于 2023-02-20 13:26
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一、宫颈原位癌的概念子宫颈原位癌是从宫颈上皮内瘤样病变进展而来,包含在重度不典型增生即CINⅢ的分类中,它指的是当癌细胞占上皮内全层或接近全层,尚未穿破上皮基底膜侵入下方固有膜者。宫颈原位癌的异型细胞比各级非典型增生者更具有显着的多形性,上皮层完全为癌细胞所取代,细胞大小不一、形状不一、排列紊乱、层次不清、极向消失。细胞核大而浓染、核浆比值增大,细胞膜、细胞间桥及细胞境界不清,核分裂像散见于全层
发布于 2023-04-20 12:02
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