1、摄入不足。常见于营养不良、偏食、挑食或进食不良的婴幼儿。叶酸衍生物不耐热，长时间烹调或反复加热食物会破坏叶酸衍生物，导致摄入不足。
2、吸收障碍。影响空肠粘膜吸收的各种疾病，如短肠综合征、热带口炎腹泻和某些先天性疾病的酶缺乏等，都会影响叶酸在小肠的吸收。
3.治疗性药物干扰叶酸代谢：如抗惊厥药、磺胺嘧啶可引起某些人群的叶酸吸收障碍。甲氨蝶呤等抑制二氢叶酸还原酶，使二氢叶酸不能转化为具有生物活性的四氢叶酸。口服避孕药、氟尿嘧啶酰亚胺、异烟肼、乙腈和环丝氨酸可影响叶酸吸收和代谢。乙醇也会影响叶酸的代谢。
4.需要量增加引起相对缺乏：怀孕期间，特别是前3个月，对叶酸的需要量可增加5～10倍此外，哺乳期母亲、婴儿、感染、发热、甲状腺功能亢进、白血病、溶血性贫血恶性肿瘤和血液透析时，对叶酸的需要量也会增加，如果不增加叶酸的摄入，会引起缺乏。
