：隨著中藥現代化的不斷進展，中藥治療疾病達到了分子水平的研究。中藥含有多種化學成分，其中許多成分對人體有害，誘導致癌、致畸。中藥現代化的目標就是要用現代化的科技手段去其糟粕，取其精華，提純中藥中有益的單一的化學成分，達到療效確切，質量可控，以符合國際標準。這就要求臨床醫生對中藥中有益的單一的化學成分進行抗疾病的藥理學及療效觀察研究。 癲癇是小兒神經系統中常見病、多發病。小兒癲癇的患病率為3‰~6‰[1]，且有增加的趨勢。根據古代文獻及現代醫家驗證，中藥石菖蒲對癲癇有確切療效。中藥石菖蒲含有多種化學成分，其中許多成分對人體有害，誘導致癌、致畸。α-細辛醚是石菖蒲的主要成分，安全性好，臨床上已在呼吸系統疾病中使用。本研究通過現代分子生物學及免疫學方法探討中藥石菖蒲及其主要成分α-細辛醚抗癲癇幼鼠的臨床觀察及機制研究。 我們選用21~28d的Wistar幼鼠作為研究對象，開始21d的Wistar幼鼠用戊四氮(PTZ)60mg/kg腹腔注射製作癲癇模型，模型成功與否以其發作時的行為變化為主要依據，按Racine分級：0級，無任何反應;1級，面部陣攣，包括眨眼、動須、節奏性咀嚼等;2級，1級加節律性點頭;3級，2級加前肢陣攣;4級，3級加後肢站立;5級，4級加摔倒。達到4~5級的幼鼠選用，未達到4級的幼鼠淘汰。選用的癲癇模型幼鼠隨機分為生理鹽水組(A組)、苯巴比妥鈉組(B組)、石菖蒲組(C組)、α-細辛醚組(D組)，每組各10只。採用灌胃方法，一日2次，共7d。按章元沛主編的《藥理學實驗》(第2版1999年附錄五)，人和動物藥物劑量換算法，生理鹽水0.5ml/次，苯巴比妥鈉18mg/kg/d(相當於人3mg/kg/d)，石菖蒲2350mg/kg/d(相當於人400mg/kg/d)，α-細辛醚29mg/kg/d(相當於人5mg/kg/d)劑量灌胃。7d後，即對28d的Wistar幼鼠再給予一次戊四氮(PTZ)60mg/kg腹腔注射後，分別進行考察以下指標。 WP=98 第一部分 石菖蒲及其成分α-細辛醚對幼鼠電刺激反應性和電致驚厥閾的影響 目的 觀察石菖蒲及其成分對幼鼠電刺激反應性和電致驚厥閾的影響，以闡明石菖蒲及其成分抗兒童癲癇的有效性。方法 將70只3周齡Wister幼鼠隨機分為灌胃組和腹腔注射組，其中灌胃組分為生理鹽水組(A組)、苯巴比妥鈉組(B組)、石菖蒲組(C組)、α-細辛醚組(D組)，腹腔注射組分為生理鹽水組(E組)、苯巴比妥鈉組(F組)、α-細辛醚組(G組)，每組各10只。灌胃組於用藥前後5d，腹腔注射組於用藥前後1h分別給予電刺激，觀測電刺激反應性和電致驚厥閾。結果 石菖蒲及其成分α-細辛醚能提高電刺激反應性和電致驚厥閾，治療前各組無顯著差異(P0.05)，治療後用藥組與治療前用藥組及生理鹽水對照組比較均有顯著差異(P0.01)。治療後用藥組各組比較無顯著差異(P.05)。結論 (1)石菖蒲及α-細辛醚能提高幼鼠電刺激反應性和電致驚厥閾，有較好的抗癲癇作用。石菖蒲與α-細辛醚的療效一致。(2)α-細辛醚是石菖蒲抗癲癇的主要有效成分之一，值得進一步研究。 第二部分 石菖蒲及其成分α-細辛醚對癲癇幼鼠驚厥行為及腦電圖的影響 目的 觀察中藥石菖蒲及其主要成分α-細辛醚(α-Asarone)對癲癇幼鼠行為和額葉放電的影響，為中藥石菖蒲及其主要成分α-細辛醚抑癇機制研究提供理論依據。方法 利用腦立體定位手段，將電極埋入幼鼠腦部雙側額葉皮質，記錄用藥前後由戊四氮(PTZ)誘發癲癇幼鼠腦電變化並觀察動物行為的改變。結果 行α-細辛醚、石菖蒲、苯巴比妥鈉藥物治療的幼鼠癲癇發作潛伏期顯著延長，2h內強直-陣攣發作的次數明顯減少，平均持續時間縮短，額葉皮層放電次數減少，與致癇生理鹽水灌胃組比較有差異(P0.05)。但α-細辛醚、石菖蒲組上述作用不如苯巴比妥鈉組強(P0.05)。α-細辛醚與石菖蒲組上述作用比較無差異(P.05)。結論 α-細辛醚是和石菖蒲一樣能有效抑制戊四氮誘發的幼鼠的癲癇發作，但作用不如苯巴比妥鈉強。 WP=99 第三部分 石菖蒲及其成分α-細辛醚對癲癇幼鼠運動行為和記憶功能的影響 目的 探討中藥石菖蒲及其成分α-細辛醚對癲癇幼鼠行為運動和空間學習記憶能力的影響。方法 50只Wistar幼鼠隨機分為未致癇的生理鹽水組(NG)和致癇的生理鹽水組(A)、苯巴比妥鈉組(B)、石菖蒲組(C)、α-細辛醚組(D)。動態觀察各組在斜板試驗、懸吊試驗、自主活動試驗中行為運動的變化以及在Morris水迷宮中空間學習記憶能力的改變。結果 ①在斜板試驗中，A組 致癇生理鹽水灌胃組轉體時間最長，較其他各組差異有顯著性(P0.05);B組 苯巴比妥鈉灌胃組次之，較NG、C、D三組差異有顯著性(P0.05);NG、C、D三組間差異無顯著性(P.05)。②懸吊試驗中，A組懸吊能力受損，表現為懸吊時間縮短，並隨驚厥次數的增加而加重，和其他四組比較差異有顯著性(P0.05);B組次之，較NG、C、D三組差異有顯著性(P0.05);NG、C、D三組間差異無顯著性(P.05)。③自主活動試驗中，同其他四組相比，A組幼鼠的自主活動能力受損，自主活動性最差，差異有顯著性(P0.05);B組次之，較NG、C、D三組差異有顯著性(P0.05);NG
【關鍵詞】：癲癇 石菖蒲 α-細辛醚 苯巴比妥鈉 Wistar幼鼠 腦海馬CA1、CA3區 電刺激 腦電 斜板試驗 懸吊試驗 自主活動試驗 Morris水迷宮 免疫組化 HE和TUNEL染色 Bax和Bcl-2基因 原位雜交 穀氨酸脫羧酶(GAD67)mRNA、氨基丁酸轉氨酶(GABA-T)mRNA和穀氨酸受體(NMDAR1)mRNA 、γ-氨基丁酸受體A類β亞單位(GABAARβ)mRNA.
