糖原累積症產前如何診斷

　　G6Pase是糖原分解和葡萄糖生成過程中的關鍵酶，主要在肝臟、腎臟和小腸中表達，對維持正常血糖水平發揮重要作用。它位於17號染色體長臂2區1帶，約有12.5kb，包含5個外顯子。G6Pase蛋白為細胞內質網膜蛋白，包含357個氨基酸，為高度疏水性蛋白，有9個跨膜單位，其N端位於內質網腔內，C端位於質膜上。在G6Pase基因克隆以前，產前診斷需通過胎兒肝穿活檢測定G6Pase的活性進行，因這種檢查為有創性的檢查而且酶活性測定的重複性差而很少使用[5]。近年，隨著G6Pase cDNA的克隆，世界各地的G6Pase基因突變譜和突變熱點逐漸得以明確，使通過分子生物學方法進行產前診斷成為可能。迄今，G6Pase基因編碼區已發現70餘種突變。國外文獻報到了4個經突變檢測法進行產前診斷的GSD Ia家系[6～9]。研究發現在不同種族和地理來源的人群中有幾種常見的突變類型，如R83C和Q347X突變在白種人中最常見 [10]。我們近來的研究發現727G→T突變佔26例中國人GSD Ia患者總突變的78.85％，R83H突變佔26例患者總突變的13.46％，727G→T和R83H突變合計約佔總突變的92％，為中國人中最常見的熱點突變[11]。突變的集中性使在中國人中開展基因診斷和產前診斷成為可能，可以首先應用限制性內切酶圖譜分析方法進行727G→T和R83H突變的篩查，再對其他突變通過DNA直接測序進行檢測。本研究的3個家系正是採用該方法迅速明確了基因診斷和產前診斷。
　　產前診斷是防止遺傳代謝性疾病發生的有效措施之一，最好聯合使用不同的方法確保診斷準確而快速。多態性連鎖分析是進行基因診斷和產前診斷的間接途徑，在具體家系中用基因內或旁側的多態性位點或片段進行單倍體連鎖分析，根據與致病基因連鎖的多態性位點或片段進行間接診斷。研究發現G6Pase的3’非翻譯區1176位點單核苷酸有T或C多態性（Genbank U01120），我們以往的研究發現中國人中1176C約佔46％ （24/52），1176T佔54％ （28/52），中國人中這個單核苷酸多態性位點多態信息含量和雜合度較高，分別為0.372和0.50[11～12]。G6Pase基因全長12.5kb，1176T/C距離G6Pase最後1個外顯子只有22bp,  故1176T/C與G6Pase基因突變位點發生基因重組的幾率可忽略不計，這就使1176T/C對GSD Ia家系的產前診斷和攜帶者診斷有很大意義。本研究中家系1的父母均為1176T/C雜合子，先證者為1176C純合子，胎兒為1176T/C雜合子，在這個家系中可以僅通過1176多態性位點家系連鎖分析就可做出明確的產前診斷。家系2和3的父親為1176T/C雜合子，母親為1176C純合子，先證者為1176C純合子，在這個家系中1176位點單核苷酸多態性僅可提供50％的信息，即只有當胎兒1176位點單核苷酸多態性為1176T/C時方能對胎兒做出明確的產前診斷，當胎兒1176位點單核苷酸多態性為1176C純合時無法做出產前診斷。