作為最受關注的遺傳缺陷性疾病，杜興氏型肌營養不良症一直受到國際醫學和生物醫學界的關注，各種新發現和新突破也在第一時間應用於DMD基因治療。
就在剛剛過去的2015年最後一天，國際權威雜誌《科學》，一口氣在線發表了三篇關於CRISPR/Cas9基因編輯技術應用於DMD基因治療的論文。這三篇論文由三家美國研究機構（哈佛大學、杜克大學和德克薩斯大學）獨立發表，提交時間相近。
這三篇論文關注的是同一個話題，即應用基因編輯技術治療DMD。
這三篇論文有很多共同點：
1.它們都使用CRISPR/Cas9技術來做缺失基因編輯；
2.它們都使用最廣泛的動物基因編輯技術。他們都以應用最廣泛的DMD動物模型--mdx小鼠為研究對象，在動物身上進行體內試驗。mdx小鼠DMD的基因編輯旨在完全刪除這個外顯子，創造一個沒有23號外顯子的永久性DMD基因。
3、二者都使用被廣泛認可的AAV作為載體，在體內將基因編輯的成分運送到細胞中。
4、除了觀察到的肌肉病理的改善--肌肉細胞膜上Dystrophin蛋白的重新出現--所有三個團隊都證實治療小鼠的肌肉力量增加。
5.都做了多種給藥方法，包括局部肌肉注射和靜脈注射以及腹腔注射的全身給藥。
6.所有的人都證實，在全身治療期間，包括心肌在內的全身各種肌肉都看到了Dystrophin的再表達。
不過，也有一些不同之處。哈佛大學的Tabebordbar團隊，嘗試用一個AAV9載體來傳遞所有CRISPR/Cas9基因編輯部分，但通過比較，結果不如使用兩個AAV9載體，分別傳遞saCas9和引導RNA。此外，同時做了tdTomato報告基因的實驗，再次證實了體內基因編輯的可行性。杜克大學的Nelson團隊應用的AAV載體是AAV8，而不是肌肉組織通常選擇的AAV9，也取得了良好的效果。德克薩斯大學的Long團隊選擇了加載在AAV9中的較大的經典spCas9。
應該說，這是一個里程碑式的結果。三個團隊取得了相同的結果，從而確立了CRISPR/Cas9基因編輯技術在治療DMD方面的潛力。這一新興療法的優勢包括：
1.基因編輯技術是在DNA水平上進行的，只需一次治療就可以達到永久的效果。不像外顯子跳轉需要長期用藥。可以恢復的肌營養蛋白更接近全長的肌營養蛋白，比導入迷你肌營養蛋白（或微肌營養蛋白）的功能更強。
2.攜帶獨立CRISPR/Cas9部件的雙AAV載體將成為標準做法，其中AAV-saCas9或AAV-spCas9是通用部件，可應用於任何疾病和任何突變，只需準備不同的AAV-gRNA來針對不同的區域，從而治療不同的疾病和突變類型。這有利於大規模生產和降低成本。就DMD而言，幾乎所有類型的致病突變，如大片段缺失、大片段重複、錯義突變、微缺失、微重複、剪切位點突變等，都可以通過這一治療系統得到改善。
3、AAV是目前公認的安全載體，已用於人體臨床試驗，其安全性將得到進一步驗證。因此，兩者的結合是一種完美的搭配，將推動DMD等基因缺陷性疾病的基因治療快速發展。
當然，這個新事物仍有不完善之處，需要加以優化。首先，始終存在著脫靶CRISPR/Cas9基因編輯的問題，這意味著在預定的編輯區域之外存在著意想不到的DNA編輯。這些額外的DNA編輯可能導致功能喪失或過度激活不相關的蛋白質，這可能引發不可預測的嚴重副作用。只有通過更精細的設計，不斷減少脫靶率，並考慮到不同患者基因組的變異性，才能更好地應用於臨床。其次，AAV抗體已經存在於一些人體內，這將大大影響AAV載體的靶向傳遞效率。最後，儘管mdx小鼠是最常用的DMD動物模型，但缺乏Dystrophin蛋白的小鼠的臨床表型比DMD患者的表型要溫和得多，而且根本不影響生命的長度。因此，正式應用於患者的真實效果存在不確定性。小鼠模型和大型動物與人類之間的巨大差異以前已經多次出現過。
新的一年一定會預示著新的希望。
