1、實驗室檢查
急性化膿性骨髓炎患者早期血液中白細胞及中性粒細胞均明顯增高，白細胞計數增高，一般都在10×10的9次方/L以上，中性粒細胞可佔90%以上。可伴有貧血及血沉增快。早期血液細菌培養的陽性率為50%～75%，通常在感染後24h即可獲得血液陽性培養結果。局部骨穿刺抽出膿液，塗片找到細菌即可確診。血液及膿液細菌培養的同時，均應作細菌藥物敏感試驗，以便選擇有效的抗生素治療。
2、細菌學檢查
血培養可獲致病菌，但並非每次培養均可獲陽性結果，特別是已經用過抗生素者血培養陽性率更低，在寒戰高熱期抽血或初診時每隔2小時抽血培養一次，共三次，可以提高血培養陽性率，所獲致病菌均應作藥物敏感試驗，以便調整抗生素。
3、局部膿腫風層穿刺
選用的內芯的穿刺針，在壓痛最明顯的幹骺端刺入，邊抽吸邊深入，不要一次穿入骨內，以免將單純軟組織膿腫的細菌帶入骨內，抽出渾濁液體或血性液可作塗片檢查與細菌培養，塗片中發現多是膿細胞或細菌即可明確診斷。任何性質突刺液都應作細菌培養與藥物敏感試驗。
4、X線檢查
起病後14天內的X線檢查往往無異常發現，用過抗生素的病例出現X線表現的時間可以延遲至1個月左右。X線檢查難以顯示出直徑小於1cm的骨膿腫，因此早期的X線表現為層狀骨膜反應與幹骺端骨質稀疏。當微笑的骨膿腫合併成較大膿腫時才會在X線片上出現幹骨區散在性蟲蛀樣骨破壞。死骨可大可小，小死骨表現為密度增高陰影，位於膿腔內，與周圍骨組織完全遊離。大死骨可為爭段骨壞死，密度增高為而無骨小梁結構可見!少數病例有病理性骨折。
5、CT檢查
可以提前發現骨膜下膿腫。對細小的骨膿腫仍難以顯示。
6.MRI檢查
可以更早期發現在長骨幹骺端與骨幹內有炎性異常信號，還可以顯示出骨膜下膿腫。因此，MRI檢查明顯優於X線和CT檢查。
7、核素骨顯像
病灶部位的血管擴張和增多，使99m鍀早期濃聚於幹骨端的病變部位的一般於發病後48小時即可有陽性的結果。核素骨顯像只能顯示出病變的部位。但不能作出定性診斷，因此該項檢查只具有間接幫助診斷的價值。
